Sistema Eletrônico de Administração de Eventos - UERGS, IX SIEPEX - IX Salão Integrado de Ensino, Pesquisa e Extensão

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OBTENÇÃO E GENOTIPAGEM DE MUTANTES COM INSERÇÃO DE T-DNA EM ESTUDO DA FUNÇÃO GÊNICA DE AT1G52200 EM ARABIDOPSIS THALIANA
LOUISE THOME CARDOSO, Fernanda VALANDRO, Paloma Koprovski MENGUER, Márcia Maria Auxiliadora Naschenveng Pinheiro MARGIS, Alexandro CAGLIARI

Última alteração: 2019-06-07

Resumo


Arabidopsis thaliana é uma dicotiledônea da família Brasicaceae classificada como um organismo-modelo e com aplicação em estudos da genética funcional devido às suas características, tais como: genoma pequeno e completamente mapeado (cinco cromossomos e cerca de 146 milhões de pares de bases), porte pequeno, ciclo de vida curto (aproximadamente seis semanas) e o grande número de sementes geradas. A análise de mutantes para genes de interesse permite determinar o quanto um gene é afetado por meio da genética reversa, que estuda o impedimento da expressão de um gene de forma reduzida (mutante knockdown) ou a ausência completa da expressão do gene (mutante knockout). Em estudos recentes, a família gênica PLAC8 (Placenta-specific genes), encontrada em fungos, algas, plantas superiores e animais, foi descrita com dezessete genes. Um desses genes é o At1g52200, o qual está supostamente envolvido na morte celular programada em plantas, atuando na defesa contra patógenos e estresses ambientais. Em vista disso, o objetivo do projeto foi obter, genotipar e caracterizar linhagens mutantes de A. thaliana com inserção de T-DNA no gene At1g52200. Os mutantes obtidos a partir do banco de sementes Arabidopsis Biological Resource Center (ABRC) foram o CS85203 com inserção no promotor e o CS378853 com inserção no primeiro éxon do gene At1g52200. A genotipagem dos mutantes realizou-se através de reações de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e a seleção dos mutantes por meio do cultivo de sementes de A. thaliana em meio de cultura Murashige and Skoog Basal (MS) com antibióticos em comparação ao cultivo de sementes selvagem Columbia-0 em MS sem suplementação. Posteriormente, serão realizadas análises fenotípicas como metodologia para mensurar as contribuições do gene comparando com o genótipo selvagem. Futuramente, serão identificadas as respostas dos mutantes de Arabidopsis thaliana com inserção de T-DNA para o gene At1g52200 perante a estresses abióticos, estabelecendo o papel da proteína PLAC8 em plantas.

Palavras-chave


Morte celular programada; Estresse abiótico; Gene At1g52200.